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透射电镜样品准备方法及要求

2020-04-27 10:38:00

1、动物组织样本

①1-3min分钟内取材,务必保持组织新鲜,取材1mm×1mm×1mm大小。修整组织可先在电镜固定液中固定30min左右待组织变硬后再修整进行后固定。

②取材时尽量精确到需要观察的目的部位,刀片要锋利,尽量避免机械损伤。

③取材后尽快投入电镜专用固定液中室温避光固定2h-4h,4℃保存,低温(冰袋)运输,切勿冷冻、尽快包埋。

2、植物组织样本

①取材要求同动物组织

②漂浮植物组织可通过真空抽气使组织沉淀,或用滤纸将组织浸在固定液里

3、细胞样本

方法一:(贴壁细胞)

①培养好的细胞弃培养基后加入电镜专用固定液常温避光固定5min左右,刮刀轻轻刮下细胞,切勿反复剐蹭。移入离心管离心2min左右,收集细胞团约绿豆大小。

②弃固定液重新加入电镜专用固定液,室温避光固定约30min,转移4℃保存,低温(冰袋)运输,切勿冷冻、尽快包埋。

方法二:(贴壁细胞)

①培养好的细胞弃培养基后加入胰酶消化,用吸管吸入离心管离心2min左右,收集细胞团约绿豆大小。

②弃上清加入电镜专用固定液,室温避光固定约30min,转移4℃保存,低温(冰袋)运输,切勿冷冻、尽快包埋。

方法三:(悬浮细胞)

离心收集收集细胞团约绿豆大小。弃培养基加入电镜专用固定液,室温避光固定约2h,转移4℃保存,低温(冰袋)运输,切勿冷冻、尽快包埋。

4、细菌样本

①长于固定培养基的细菌:连带培养基一起挑下细菌置于电镜固定液内室温避光固定约2h,转移4℃保存,低温(冰袋)运输,切勿冷冻、尽快包埋。

②悬浮细菌孢子:离心收集收集细胞沉淀约绿豆大小,弃培养基加入电镜专用固定液,室温避光固定约2h,转移4℃保存,低温(冰袋)运输,切勿冷冻、尽快包埋。

 
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