实验简介
免疫印迹(immunobloting)又称蛋白印迹(Western bloting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。结合化学发光检测,可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。
实验流程
温馨提示
1.检测样本:新鲜的组织、细胞、全血、植物样本等
2.样本量,细胞样本检测一个指标的最低细胞含量是1*10^6,组织样本检测一个指标的最低组织样品为30mg(建议多提供样本,便于提取蛋白);全血和植物样本详细咨询我司。
3.样本保存及运输
(1)新鲜的组织:液氮速冻,-80℃保存,干冰运输
(2)悬浮细胞:收集完以后,冷的PBS洗3遍,吸净残余的液体,-80℃冻存,干冰运输
(3)贴壁细胞:胰酶消化,离心去上清,PBS冲洗离心去上清,-80℃冻存,干冰运输
(4)全血采用冰袋维持4℃运输,严禁用干冰和液氮运输,血清和血浆可采用液氮、干冰运输。
(5)植物样本:收集完后清洗灰尘,液氮或者干冰保存运输